One Step RT-qPCR SYBR Green Premix
Katuaren zenbakia: HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix fluoreszentzia kuantifikaziorako da SYBR Green I koloratzailean oinarrituta.Geneen espezifikoen abiarazleak erabiliz, alderantzizko transkripzioa eta qPCR erreakzioak hodi bakarrean burutzen dira, tapoiak irekitzeko eta pipeteatzeko eragiketak errepikatu beharra ezabatuz, saiakuntzaren eraginkortasuna asko hobetuz eta kutsadura arriskua murriztuz.RNA laginetarako, kitak bero-erresistentzia Alderantzizko Transkriptasa erabiltzen du cDNA sintesi eraginkorra lortzeko eta HotStart Taq DNA Polymerase anplifikazio kuantitatiborako.Buffer-sistema optimizatuaren arabera, kitaren sentsibilitatea 0,1 pg-koa izan daiteke oso adierazitako helburuetarako eta 1 pg-rainokoa neurrizko adierazitako helburuetarako.Kit egokia da DNA laginak anplifikatu eta kuantifikatzeko.Landare- eta animalia-lagin, zelula eta mikroorganismo desberdinetako azido nukleikoak detektatzeko eta kuantifikatzeko aukera ematen du.
Osagaiak
| No | Izena | Bolumena | Bolumena |
| 1 | Buffer aurreratua | 250 μL | 2 × 1,25 ml |
| 2 | Entzima nahasketa aurreratua | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNasa askea H2O | 250 μL | 2 × 1,25 ml |
Biltegiratzeko baldintzak
Produktu hau -25 ~ -15 ℃-tan gorde behar da argitik urrun urtebetez.
Argibideak
1.Erreakzio sistemaren konfigurazioad
| Osagaiak | Bolumena (μL) | Bolumena (μL) | Azken kontzentrazioa |
| Buffer aurreratua | 12.5 | 25 | 1× |
| Entzima nahasketa aurreratua | 1 | 2 | - |
| Aurrerako Primer (10 μmol/L)a | 0,5 | 1 | 0,2 μmol/L |
| Alderantzizko Primer (10 μmol/L)a | 0,5 | 1 | 0,2 μmol/L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNasa askea H2Oc | 25era | 50era | - |
Oharrak:
1) a.TInprimagailuaren azken kontzentrazioa 0,2 μmol/L-koa izan zen, eta, halaber, 0,1 eta 1μmol/L artean egokitu zitekeen.
2) b.Erreaktiboa oso sentikorra da, RNA Totala 1pg-1μg bitartekoa izanik, eta giza laginen probak 1 pg-100 ng-ko sarrera optimoa erakutsi zuen, 15-30 bitarteko Ct balio orokorra kontrolatuz.
3) c.20μL edo 50μL erabiltzea gomendatzen da xede-genearen anplifikazioaren baliozkotasuna eta erreproduzigarritasuna bermatzeko.
4) d.Mesedez, prestatu ultra-garbiko bankuan eta erabili nukleasa-hondakinik gabeko puntak eta erreakzio-hodiak;iragazki-kartutxoak dituzten aholkuak gomendatzen dira.Saihestu kutsadura gurutzatua eta aerosolen kutsadura.
2.Erreakzio programa
| Ziklo-pausoa | Tenperatura. | Denbora | Zikloak |
| Alderantzizko transkripzioa | 50℃a | 6min | 1 |
| Hasierako desnaturalizazioa | 95℃ | 5min | 1 |
| Anplifikazio erreakzioa | 95℃ | 15 seg | 40 |
| 60℃b | 30 seg | ||
| Urtze-kurba etapa | Instrumentu lehenetsiak | 1 | |
Oharrak:
1) a.Alderantzizko transkripzio-tenperatura 50-55 °C artean hauta daiteke, behar esperimentalen arabera.DNA laginetarako, alderantzizko transkripzio-prozesua ezabatu daiteke.
2) b.Kasu berezietan errezistatzeko/luzatzeko tenperatura lehen Tm balioaren arabera egokitu daiteke, 60°C gomendatzen da.
Oharrak
1. Produktu hau ikerketarako soilik da.
2. Mesedez, funtzionatu laborategiko batekin eta botatzeko eskularruekin, zure segurtasunerako.
