One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Katuaren zenbakia: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) zundan oinarritutako RT-qPCR detekzio azkarreko kit bat da, RNA txantiloi gisa erabiliz (adibidez, RNA birusa) PCR kuantitatibo bakarreko edo multiplexetarako egokia.Produktu honek antigorputz aldatutako Taq DNA polimerasa eta urrats bakarreko Alderantzizko Transkriptasa dedikatuaren belaunaldi berri bat erabiltzen du, anplifikazio azkarrerako buffer optimizatu batekin, anplifikazio-abiadura azkarragoa, anplifikazio-eraginkortasuna eta espezifikotasun handiagoa duena.Anplifikazio orekatua onartzen du kontzentrazio baxuko eta handiko lagin monoplex nahiz multiplexetan denbora laburrean.
Osagaiak
1. 5×RT-qPCR buffer (U+)
2. Entzima nahasketa (U+)
Oharrak:
a.5×RT-qPCR buffer (U+) dNTP eta Mg barne hartzen ditu2+;
b.Entzima nahasketak (U+) alderantzizko transkriptasa, Hot Start Taq DNA polimerasa, RNasaren inhibitzailea eta UDG barne hartzen ditu;
c.Erabili RNaserik gabeko aholkuak, EP hodiak, etab.
Erabili aurretik, ondo nahastu 5×RT-qPCR buffer (U+).Desizoztu ondoren prezipitaziorik badago, itxaron tampona giro-tenperaturara itzultzen den arte, nahastu eta disolbatu, eta, ondoren, erabili normalean.
Biltegiratzeko baldintzak
Produktua izotz lehorrekin bidaltzen da eta -25 ~ -15 ℃-tan gorde daiteke urtebetez.
Argibideak
1. Erreakzioa Sistema
| Osagaiak | Bolumena (20 μL erreakzioa) |
| 2 ×RT-qPCR buffer | 4μL |
| Entzima nahasketa (U+) | 0,8μL |
| Primer Aurrera | 0,1 ~ 1,0μM |
| Primer Alderantzizkoa | 0,1 ~ 1,0μM |
| TaqMan Probe | 0,05~0,25μM |
| Txantiloia | X μL |
| RNasirik gabeko ura | 25μL arte |
Oharrak: Erreakzio bolumena 10-50μL da.
2. Bizikleta Protokoloa (Sestandarra)
| Zikloa urratsa | Tenperatura. | Denbora | Zikloak |
| Alderantzizko transkripzioa | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Hasierako Desnaturalizazioa | 95 ℃ | 30 seg | 1 |
| Desnaturalizazioa | 95 ℃ | 10 seg | 45 |
| Errekostea/Luzapena | 60 ℃ | 30 seg |
| Bizikleta Protokoloa (Azkar) Zikloa urratsa |
Tenperatura. |
Denbora |
Zikloak |
| Alderantzizko transkripzioa | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Hasierako Desnaturalizazioa | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Desnaturalizazioa | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Errekostea/Luzapena | 60 ℃ | 10 s |
Oharrak:
a.Alderantzizko transkripzioaren tenperatura 50 ℃ eta 60 ℃ artekoa da, tenperatura handitzeak egitura konplexuak eta CG eduki handiko txantiloiak areagotzen laguntzen du;
b.Erretiro-tenperatura optimoa hasierako Tm balioaren arabera egokitu behar da, eta denbora errealeko PCR tresnan oinarrituta fluoreszentzia-seinaleak biltzeko denborarik laburrena aukeratu.
Oharrak
Mesedez, jantzi beharrezko PPEak, hala nola laborategiko bata eta eskularruak, zure osasuna eta segurtasuna bermatzeko!
