Multiplex One Step RT-qPCR Aurrenahasketa
Deskribapena
Katuaren zenbakia: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix PCR kuantitatibo multiplex bat da, RNAn txantiloi gisa oinarritutakoa.Esperimentuan, alderantzizko transkripzioa eta PCR kuantitatiboa egiten dira erreakzio-hodi berean, eragiketa esperimentala erraztuz eta kutsatzeko arriskua murriztuz.Buffer eta entzima nahasketaren diseinu berezia urrats bakarreko sistema liofilizatuan erabil daiteke.Kitak bero-erresistentea den Alderantzizko Transkriptasa erabiltzen du lehen katearen cDNAren sintesia eraginkorra egiteko, hotstart Taq DNA Polymerase erabiliz, anplifikazio kuantitatiborako.Erreakzio-buffer optimizatua, entzimak nahasketa eta abar ditu, eta PCR anplifikazio ez-espezifikoa modu eraginkorrean inhibitzen duten eta qPCR erreakzio anitzen anplifikazio-efizientzia hobetzen duten faktoreak gehitu ziren, fluoreszentzia anitzeko anplifikazio kuantitatiboa ahalbidetuz, abiarazteen anplifikazio-eraginkortasuna bermatuz.
Osagaiak
| Izena |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-Entzima Nahasketa |
| 3. Lyo babeslea |
Garraioaren baldintzaioia
A: Lyo-buffer eta babeslea: -25 ~ -15 ℃, iraupena urtebetekoa da.
B: Lyo-entzima nahasketa, 2-8 ℃, iraupena 6 hilabetekoa da.
Funtzionatzeko argibideak
1. Erreakzio-sistema (hartu 25μL adibide gisa)
| Osagaiak | Bolumena (μL) | Azken Kontzentrazioa |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Lyo-entzima nahasketa | 1 | - |
| Lyo-Babeslea | 8 | - |
| Primer nahasketa (10μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Zunda nahasketa (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5uM |
| RNA txantiloia | 5 | - |
| DEPC H2O | 25 arte | - |
2. Bizikleta Protokolo optimizatua
1) Bizikleta Protokolo Estandarra
| Erreakzio etapa | Tenperatura | Denbora | Zikloa | |
| 1 | Alderantzizko transkripzioa | 50°Ca | 10min | 1 |
| 2 | Hasierako desnaturalizazioa | 95°C | 5min | 1 |
| 3 | Anplifikazio erreakzioa | 95°C | 15seg | 45 ziklo |
| 60°Cb | 30segc |
2) Bizikleta azkarreko protokoloa
|
| Erreakzio etapa | Tenperatura | Denbora | Zikloa |
| 1 | Alderantzizko transkripzioa | 50°Ca | 2min | 1 |
| 2 | Hasierako desnaturalizazioa | 95°C | 2 seg | 1 |
| 3 | Anplifikazio erreakzioa | 95°C | 1seg |
45 ziklo |
| 60°Cb | 13segc |
Ohar:
a) Alderantziz transkripzioa: Tenperaturak 42 °C edo 50 °C hauta ditzake 10-15 minutuz.
b) Anplifikazio erreakzioa: Tenperatura diseinatutako primeren Tm balioaren arabera doitzen da.
c)Fluoreszentzia seinalea eskuratzea: Ezarri prozedura esperimentalaren eskakizunen araberatresna eskuliburua.
Informazio teknikoa/zehaztapenak
| Hasiera beroa | Abio beroa integratua |
| Detektatzeko metodoa | Primer-zunda detekzioa |
| PCR metodoa | Urrats bakarreko RT-qPCR |
| Lagin mota | RNA |
Oharrak
1. Produktu hau ikerketarako soilik da.
2. Mesedez, jantzi beharrezko PPE, hala nola laborategiko bata eta eskularruak, zure osasuna eta segurtasuna bermatzeko!
