Bst 2.0 DNA polimerasa (glizerolarik gabekoa, dentsitate handikoa)
Bst DNA polimerasa V2 Bacillus stearothermophilus DNA polimerasatik eratorria da, 5′→3′ DNA polimerasa jarduera eta katearen ordezkapen jarduera handia duena, baina 5′→3′ exonukleasa jarduerarik ez duena.Bst DNA Polymerase V2 aproposa da kate-desplazamendurako, anplifikazio isotermiko LAMP (Loop mediated isothermal amplification) eta sekuentziazio azkarrerako.Bst DNA polimerasa V2 honek DNA polimerasaren jarduera inhibitzeko gai da giro-tenperaturan, funtzionatu ahal izateko eta erreakzio-sistema giro-tenperaturan formulatu ahal izateko, anplifikazio ez-espezifikoa saihestuz eta erreakzioaren eraginkortasuna hobetuz, eta bertsio honek liofilizatuta egon.Horrez gain, tenperatura altuetan bere jarduera askatzeko gai da, eta horrela aktibazio-urrats bereizi baten beharra ezabatzen da.
Osagaiak
| Osagaia | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polimerasa V2 (glizerolarik gabekoa) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 3 × 10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 2 × 10 ml |
Aplikazioak
1.LAMParen anplifikazio isotermikoa
2.DNA kate bakarreko desplazamendu erreakzioa
3.GC geneen sekuentziazio altua
4.Nanogramen mailaren DNAren sekuentziazioa.
Biltegiratze-baldintza
Garraioa 0°C-tik behera eta -25°C~-15°C-tan gorde.
Unitatearen definizioa
Unitate bat 65 °C-tan 30 minututan azido disolbaezin den materialari 25 nmol dNTP sartzen duen entzima-kopuru gisa definitzen da.
LAMPARA Erreakzioa
| Osagaiak | 25 μLSistema |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTPak (10 mM bakoitza) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Berdea (25×)a | 1,0 μL |
| Primer nahasketab | 6 μL |
| Bst DNA polimerasa V2 (glizerolarik gabekoa) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Txantiloia | × μL |
| ddH₂O | Gehienez 25 μL |
Oharrak:
1) a.SYTOTM 16 Berdea (25×): Behar esperimentalen arabera, beste koloratzaile batzuk erabil daitezke ordezko gisa;
2) b.Primer nahasketa: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB eta beste bolumen batzuk nahastuz lortzen da.
Erreakzioa eta Baldintza
1 × HC Bst V2 Buffer, inkubazio-tenperatura 60°C eta 65°C artekoa da.
Beroaren desaktibazioa
80°C, 20min.
