2×HiF Taq gehi Master Mix
Katuaren zenbakia: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (koloratzailearekin) Plus HIF DNA polimerasa, dNTP eta buffer optimizatua dituen 2 × aurrenahastutako soluzio bat da.Polimerasaren jarduera eta 3′→5′exonukleasa jarduera inhibitzen duten giro-tenperaturan bi antigorputz monoklonal gehitzen dira nahasketa nagusiari Hot Start PCR erraz eta oso espezifikoa egiteko.Luzapen-faktorea nahasketa maisuari gehitzen zaio entzimari zati luzeko anplifikazio-ahalmena emateko, anplifikazioaren luzera 13 kb-rainokoa izan daiteke, entzimak 5′→3′ DNA polimerasa aktibitatea du eta 3′→5′. Exonukleasaren jarduera, bere fideltasuna Taq DNA polimerasarena baino 83 aldiz handiagoa da, hau da, DNA polimerasa arruntarena baino 9 aldiz handiagoa.Txantiloi konplexuak anplifikatzeko egokia da, anplifikazio-produktua muturra da.
2×HIF Taq plus Master Mix (koloratzailearekin) azkar eta erraz, sentsibilitate handia, espezifikotasun sendoa, egonkortasun ona, etab. abantailak ditu, erreakzio-sistemak abiarazleak eta txantiloiak gehitu behar ditu eta bi-batez handitu daiteke. urratseko protokoloa, urrats esperimentalak erraztuz eta denbora aurreztuz.Produktu honek elektroforesi adierazleen koloratzaileak ditu, eta PCR produktuak zuzenean erabil daitezke elektroforesirako.Horrez gain, produktuak babes-agente espezifiko bat ere badu, nahasketa nagusiak behin eta berriz izozte-desizoztu ondoren jarduera egonkorra mantendu dezan.
Biltegiratzeko baldintzak
Produktuak -25 ~ -15 ℃-tan gorde behar dira urtebetez.
Zehaztapenak
| Produktuaren zehaztapena | Master Mix |
| Kontzentrazioa | 2× |
| Hasiera beroa | Hot Start integratua |
| Iraunkorra | Kanpokoa |
| Erreakzio-abiadura | Azkar |
| Tamaina (azken produktua) | Gehienez 13 kb |
| Garraiorako baldintzak | Izotz lehorra |
| Produktu mota | Fideltasun handiko PCR aurrenahasketak |
Argibideak
1.PCR Erreakzio Sistema
| Osagaiak | Bolumena (μL) |
| DNA txantiloia | Egokia |
| Aurrerako hasiera (10 μmol/L) | 2.5 |
| Alderantzizko Primer (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq gehi Master Mix | 25 |
| ddH2O | 50era |
2.Txantiloi desberdinen erabilera gomendatua
| Txantiloi mota | Anplifikatu zatiak 1 kb-tik 10 kb-ra |
| DNA genomikoa | 50 ng-200 ng |
| DNA Plasmidoa edo Birala | 10pg-20ng |
| cDNA | 1-2,5 µL (Ez gainditu PCR azken erreakzio-bolumenaren % 10) |
3.Anplifikazio-protokoloa
1) Bi urratseko protokoloa (konplexutasun txantiloia)
| Ziklo-pausoa | Tenperatura. | Denbora | Zikloak |
| Hasierako desnaturalizazioa | 98℃ | 3 min | 1 |
| Desnaturalizazioa | 98℃ | 10seg | 30-35 |
| Luzapena | 68 ℃ | 30 seg/kb | |
| Azken luzapena | 72 ℃ | 5 min | 1 |
2) Hiru urratseko protokoloa (protokolo arrunta)
| Ziklo-pausoa | Tenperatura. | Denbora | Zikloak |
| Hasierako desnaturalizazioa | 98℃ | 3 min | 1 |
| Desnaturalizazioa | 98℃ | 10seg | 30-35 |
| Ontzea | 60℃ | 20 seg | |
| Luzapena | 72 ℃ | 30 seg/kb | |
| Azken luzapena | 72 ℃ | 5 min | 1 |
3) Analing Gradient Protokoloa (konplexutasun txantiloia)
| Ziklo-pausoa | Tenperatura | Denbora | Zikloak |
| Hasierako desnaturalizazioa | 98℃ | 3 min | 1 |
| Desnaturalizazioa | 98℃ | 10 seg | 15 (1 ℃ murrizketa ziklo bakoitzeko) |
| Gradientea erretzea | 70-55 ℃ | 20 seg | |
| Luzapena | 72 ℃ | 30 seg/kb | |
| Desnaturalizazioa | 98℃ | 10 seg |
20 |
| Ontzea | 55℃ | 20 seg | |
| Luzapena | 72 ℃ | 30 seg/kb | |
| Azken luzapena | 72 ℃ | 5 min | 1 |
Anplifikazio protokolo ezberdineko ezaugarriak
| Protokoal | Bi Urrats | Hiru urrats | Gradientea erretzea |
| Spec. | azkar | ertaina | motela |
| Espezifikotasuna | altua | ertaina | altua |
| PCR etekina | ertaina | altua | ertaina |
| Detekzio tasa | altua | ertaina | altua |
Oharrak
Mesedez, jantzi beharrezko PPE, hala nola laborategiko bata eta eskularruak, zure osasuna eta segurtasuna bermatzeko!
