Ultra Nuclease GMP maila
Katuaren zenbakia: HC2016A
UltraNuclease GMP-maila Escherichia coli-n (E.coli) adierazi eta araztu egiten da genetikoki diseinatutako eta GMP inguruneetan prestatuta.Ikerketa zientifikoan zelula gainditzaileen eta zelulen lisatuaren biskositatea murriztu dezake, proteina arazteko eraginkortasuna areagotu eta proteinen ikerketa funtzionala hobetu dezake.Produktuak ostalariaren azido nukleikoen hondakinak pg-mailara ere murri ditzake, birusen arazketa, txertoen fabrikazioa eta proteina/polisakaridoen fabrikazio farmazeutikoa barne aplikazioetako produktu biologikoen errendimendua eta segurtasuna hobetuz.Gainera, produktua giza odol periferikoko zelula mononuklearrak (PBMC) pilatzea saihesteko ere aplika daiteke terapia zelularra eta txertoa garatzeko.
UltraNuclease esterilizatutako erreaktibo baten moduan ematen da, buffer batean (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, % 50 glizerina), kolorerik gabeko likido garden baten itxurarekin.Produktu hau GMP prozesuko eskakizunen arabera ekoizten da eta forma likidoan ematen da.
Osagaiak
UltraNuclease GMP maila (250 U/μL)
Biltegiratzeko baldintzak
Produktua izotz lehorrekin bidaltzen da eta bi urtez -25 ℃ ~ -15 ºC-tan gorde daiteke.
Produktua ireki eta astebete baino gehiago 4 ℃-tan gordetzen bada, iragaztea gomendatzen duguproduktua mikrobioen kutsadura saihesteko.
Zehaztapenak
| Adierazpen Host | E. coli birkonbinatzailea UltraNuclease genearekin |
| Pisu Molekularra | 26,5 kDa |
| puntu soelektrikoa | 6.85 |
| Garbitasuna | % ≥99 (SDS-PAGE) |
| Biltegiratze Buffer | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, % 50 glizerina |
|
Unitatearen definizioa | Jarduera-unitate baten definizioa (U) erabiltzen den entzima-kopurua daaldatu ΔA260-ren xurgapen-balioa 1,0 30 minututan 2, 625 ml bateanerreakzio-sistema 37 ℃-n 8,0 pH-arekin (digestio osoaren baliokidea37 μg izokin espermatozoide DNA oligonukleotidoetan). |
Argibideak
1. Lagina Bilduma
Zelula atxikiak: kendu medioa, garbitu zelulak PBSrekin eta kendu gainnatzailea.
Esekidura-zelulak: bildu zelulak zentrifugazio bidez, garbitu zelulak PBSrekin, zentrifugatu 6.000-tan.rpm 10 minutuz, bildu pelleta.
Escherichia coli: bildu bakterioak zentrifugatuz, garbitu behin PBSarekin, zentrifugatu 8.000tan.rpm 5 min, eta bildu pellet.
2. Laginaren tratamendua
Tratatu bildutako zelula-pelletak lisi-buffer batekin masa (g) eta bolumenaren (mL) 1: (10-20) proportzioan, edo metodo mekaniko edo kimikoen bidez izotzean edo giro-tenperaturan (1 g zelularen pellet inguru ditu.
109 zelula).
3. Entzimaren tratamendua
Gehitu 1-5mM MgCl erreakzio sistemara eta egokitu pHa 8-9ra.
Gehitu UltraNuclease 250 unitateko proportzioaren arabera 1 g zelula-pellet digeritzeko, inkubatu 37 ℃-tan 30 minutu baino gehiagoz.Mesedez, ikusi "Gomendatutako Erreakzio Denbora" formularioa aukeratzekotratamenduaren iraupena.
4. Gaindikoa Bilduma
Zentrifugatu 12.000 rpm-an 30 minutuz eta bildu gainnatzailea.
Oharra: disoluzioa azidoa edo alkalinoa bada, edo gatz, detergente edo kontzentrazio handiak baditudesnaturatzaileak, mesedez handitu entzimaren dosia edo luzatu tratamendu-denbora horren arabera.
Gomendatutako erreakzio-baldintzakonak
| Parametroa | Baldintza optimoa | Baldintza eraginkorra |
| Mg²+Kontzentrazioa | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Tenperatura | 37℃ | 0-42 ℃ |
| TDT Kontzentrazioa | 0-100 mM | > 0 mM |
| Merkaptoetanolaren kontzentrazioa | 0-100 mM | > 0 mM |
| Katioi monobalenteen kontzentrazioa | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfatoen kontzentrazioa | 0-10 mM | 0-100 mM |
Gomendagarria Erreakzioa Denbora (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Ultranukleasa kantitatea (azken kontzentrazioa) | Erreakzio Denbora |
| 0,25 U/ml | > 10 ordu |
| 2,5 U/ml | > 4h |
| 25 U/ml | 30 min |
Oharrak:
Mesedez, jantzi beharrezko PPEak, hala nola laborategiko bata eta eskularruak, zure osasuna eta segurtasuna bermatzeko!
