Fosfatasa Alkalinoa (ALP)
Deskribapena
Fosfatasa alkalinoa TAB5 genea daraman E. coli andui birkonbinatzaile batetik eratorria da.Entzimak DNAren eta RNA fosfomonoesterren 5´ eta 3´ muturren desfosforilazioa katalizatzen du.Gainera, erribosa hidrolizatzen du, baita desoxirribonukleosido trifosfatoak (NTPs eta dNTPs) ere.TAB5 Fosfatasa Alkalinoak 5' irten eta 5'-ko muturretan jarduten du.Fosfatasa biologia molekularreko aplikazio askotan erabil daiteke, hala nola klonazioan edo zundaren amaieran etiketatzean, DNAren edo RNAren muturrak fosforilatuak kentzeko.Klonazio-esperimentuetan, desfosforilazioak DNA plasmido linealizatua autoligatzea eragozten du.PCR erreakzioetan barneratu gabeko dNTPak ere degrada ditzake DNA sekuentziatzeko txantiloia prestatzeko.Entzima erabat eta atzeraezin desaktibatu egiten da 70 °C-tan 5 minutuz berotuz, eta, ondorioz, ez da beharrezkoa lotu edo amaierako etiketatu aurretik fosfatasa kentzea.
Erabilera
1.Fosfatasa alkalinoak proteinei akoplatuta (antigorputzak, estreptavidina eta abar) xede-molekulak zehazki identifikatu ditzake, eta ELISA, WB eta detekzio histokimikoan erabil daiteke;
2.Fosfatasa alkalinoa DNAren edo RNAren 5 '-terminala desfosforizatzeko erabil daiteke, auto-lotura ekiditeko;
3. Goiko DNA edo RNA desfosforilatua erradio-markatutako fosfatoen bidez markatu daiteke (T4 poli-nukleotido kinasaren bidez)
Egitura kimikoa
Zehaztapena
| Proba-elementuak | Zehaztapenak |
| Entzimaren jarduera | 5U/μL |
| Endonukleasen jarduera | Ez da detektatu |
| Exonuclease Jarduera | Ez da detektatu |
| Nicking Jarduera | Ez da detektatu |
| RNasaren jarduera | Ez da detektatu |
| E.coli DNA | ≤1 kopia/5U |
| Endotoxina | LAL-proba, ≤10EU/mg |
| Garbitasuna | ≥%95 |
Garraioa eta biltegiratzea
Garraioa:Giroa
Biltegiratzea:Gorde 2-8 °C-tan
Berriro proba gomendatuaBizitza:2 urte
