Peroxidasa (Baldin iturria) Sinonimoa: Hidrogeno peroxido oxidoreduktasa;HRP
Deskribapena
Horseradish peroxidasa (HRP) erradiaren (Amoracia rusticana) sustraietatik isolatuta dago eta ferroprotoporfirina peroxidasen taldekoa da.HRP erraz konbinatzen da hidrogeno peroxidoarekin (H2O2).Sortutako [HRP-H2O2] konplexuak hidrogeno-emaile ugari oxida ditzake:
Emailea + H2O2 → Emaile Oxidatua + 2 H2O
HRP-k hainbat substratu oxidatuko ditu (ikus 1. taula):
• Kromogenikoak
• Kimiluminiszenteak (luminola edo isoluminola, esaterako)
• Fluorogenikoak (adibidez, tiramina, azido homobanilikoa edo azido 4-hidroxifenil azetikoa)
HRP lau disulfuro zubi dituen kate bakarreko polipeptidoa da.HRP glukoproteina bat da, %18 karbohidratoak dituena.Karbohidratoen konposizioa galaktosa, arabinosa, xilosa, fukosa, manosa, manosamina eta galaktosamina ditu, isozima espezifikoaren arabera.
HRP immunoglobulinetarako etiketa oso erabilia da immunokimikako aplikazio ezberdinetan, besteak beste, immunoblotting, immunohistokimika eta ELISA.HRP antigorputzekin konjokatu daiteke hainbat metodo ezberdinen bidez, besteak beste, glutaraldehidoa, periodatoaren oxidazioa, disulfuro-loturen bidez eta baita amino eta tiol zuzendutako gurutzaketa-loturaren bidez ere.HRP da antigorputzentzat gehien desiratzen den etiketa, hiru entzima etiketa ezagunenetatik txikiena eta egonkorrena baita (peroxidasa, β-galaktosidasa, fosfatasa alkalinoa) eta bere glikosilazioak lotura ez-espezifikoa txikiagoa dakar.Glutaraldehidoa eta periodatoa konjugatzeko metodoen berrikuspena argitaratu da.
Peroxidasa disoluzioan glukosa4 eta peroxidoak zehazteko ere erabiltzen da.Hainbat argitalpenek, 6-24 tesi, 25-29 eta 30-46 tesietan P8375-aren erabilera aipatu dute ikerketa-protokoloetan.
Egitura kimikoa
Zehaztapena
Proba-elementuak | Zehaztapenak |
Deskribapena | Hauts amorfo arre-gorrixka, liofilizatua |
Jarduera | ≥100U/mg |
Garbitasuna (SDS-PAGE) | ≥%90 |
Disolbagarritasuna (10 mg hautsa/ml) | Garbi |
Entzimak kutsatzaileak | |
NADH/NADPH oxidasa | ≤%0,1 |
Katalasa | ≤0,005% |
ATPasa | ≤%0,03 |
Garraioa eta biltegiratzea
Garraioa:2-8 ºC-tik behera bidaltzen da
Biltegiratzea:Gorde -20 °C (epe luzera), 2-8 °C (epe laburrean)
Berriro proba gomendatuaBizitza:2 urte