BsaI Murrizketa Endonukleasa
Deskribapena
BsaI murrizketa entzima E.coli-k adierazitako Bacillus sphaericus-en BspQI geneak kodetutako proteina birkonbinantetik eratorritako II motako murrizketa endonukleasa da.Murrizketa-endonukleasak asko erabiltzen dira gene-mapaketa, klonazioa eta beste esparru batzuetan.Entzima honek DNA azkar mozten du geneen linealizazio eraginkorra lortzeko Bsa I, IIs murrizketa endonukleasa murrizketa endonukleasa, Bacillus stearothermophilus-en BsaI gene klonatu eta eraldatua daraman E. coli andui birkonbinatzaile batetik eratorria.bertako entzimen espezifikotasun bera eta izarren jarduera murriztua dutenak.Bere aitorpen-sekuentzia eta zatiketa guneak honako hauek dira:
5'······GGTCTC(N)······ ··3'
3'······CCAGAG(NNNNN)······5'
Egitura kimikoa
Produktuaren ezaugarriak
• Murrizketa-endonukleasak jarduera entzimatiko handia du eta digestio-erreakzioa azkar osatzen du.
• Endonukleasa aktibitate ez-espezifikoa baxua "bisturitu" ebaketa zehatza bermatzeko.
• BSA sistemarik ez, bero iturriaren kutsadura murrizten du.
Zehaztapena
Proba-elementuak | Zehaztapenak |
Entzimaren jarduera | 20 U/µL |
Garbitasuna (SDS-PAGE) | ≥%95 |
Rnase | Ez da bat ere detektatu |
DNasaren jarduera ez-espezifikoa | Ez da detektatu |
Star Jarduera | Ez da detektatu |
Lotura eta mozketa | Digestioaren ondoren, DNA zatiak lotu daitezke.Eta ligatutako zati horiek Bsal-ekin birmoldatu daitezke. |
Endotoxinak (LAL-testa) | ≤10 EU/mg |
E.Coli DNA | ≤1 kopia/2U |
Kalitate kontrola
Garbitasuna ≥% 95, DNasarik gabe, RNasa jarduera, Ostalariaren DNA hondakina ≤ 100pg/mg, ostalariaren proteina-hondakina ≤ -50ppm, endotoxina-hondarra ≤ 10EU/mg, Proteasa jarduerarik ez, antzua, mikoplasmarik gabe
Aplikazio
Plasmidoa digeritu ADN zati linealizatu bat prestatzeko Poly-ren amaieran (A/T/C/G);
Linearizatu plasmidoaren txantiloia in vitro transkripzioaren aurretik;
Murrizketa digestioa;
Unitatearen definizioa
Unitate bat Barne-kontroleko DNA 1 µg digeritzeko behar den entzima-kopuru gisa definitzen da ordu 1ean 37 °C-tan, 50 µL-ko erreakzio-bolumen oso batean.
Garraioa eta biltegiratzea
Garraioa:-15 °C-tik behera bidaltzen da
Biltegiratzea:Gorde -25~-15°C-tan
Berriz probatzeko bizitza gomendatua:1 urte