prou
Produktuak
BsaI HCP1014A Irudi nabarmendua
  • BsaI HCP1014A

BsaI


Katuaren zenbakia: HCP1014A

Paketea: 50μL/250μL/1mL/10mL/100mL

BsaI, IIs murrizketa endonukleasa murrizketa endonukleasa, E konbinatzailetik eratorria da.

Produktuaren Deskribapena

Produktuaren datuak

BsaI, IIs murrizketa endonukleasa murrizketa endonukleasa, Bacillus stearothermophilus-en BsaI gene klonatua eta eraldatua daraman E. coli andui konbinatzailetik eratorria da. Entzimaren berezko entzimaren eta izarren jarduera murriztuaren espezifikotasun bera dutenak.Bere aitorpen-sekuentzia eta zatiketa guneak honako hauek dira:

5'······GGTCTC(N)············3'

3'······CCAGAG(NNNNN)···5'


  • Aurrekoa:
  • Hurrengoa:

  • Osagaiak

    BsaI (20U/μL), 10xBsaI Buffer

     

    Biltegiratzea

    Biltegiratu -25 ℃ ~ -15 ℃-n, urtebeterako balio duena (Ekidin errepikatzen diren izozte-desizozte zikloak).

     

    Biltegiratze buffer

    10 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 1 mM DTT 0,1 mM EDTA, 200µg/ml Albumina birkonbinatzailea, %50 Glizerola.(pH 7,4 @ 25 °C).

     

    Produktuaren ezaugarriak

    Jarduera handia, digestio azkarra;

    1. Izar-jarduera baxua, "bisturioa" bezalako ebaketa zehatza bermatuz;

    2. BSArik gabe eta animalia-jatorririk gabekoa.

    Metilazio-sentsibilitatea

    Presen metilazioa: Ez da sentikorra;

    Dcm metilazioa: Gainjartzearen zenbait konbinazioek kaltetua;

    CpG metilazioa: gainjartzen diren konbinazio batzuek blokeatuta.

     

     

    Unitatearen definizioa

    Unitate batek Barne-kontroleko DNA 1 µg digeritzeko behar den entzima-kopurua definitzen du ordubetean 37 °C-tan, 50 µL-ko erreakzio-bolumen oso batean.

     

    Kalitate kontrola

    Proteinen purutasunen azterketa (SDS-PAGE): Bsa I-ren purutasuna ≥ 95% SDS-PAGE analisiaren bidez zehaztu zen Coomassie Blue detekzioa erabiliz.

    RNasa:Bsa I-ren 20 U 1,6 μg MS2 RNArekin 16 ordutan 37 ℃-tan degradazioa ematen du, agarosa gelaren elektroforesiaren bidez zehaztutako moduan.

    DNasaren jarduera ez-espezifikoa:20 Uof BsaI 1 μg PhiX174 DNArekin 16 orduz 37 ℃-tan ez du DNA gehiegirik ematen agarosa gelaren elektroforesiaren arabera.

    Lotura eta mozketa:1 μg digestioaren ondoren

    E.coli DNA:Vacciniavirus Capping Enzymearen 2Uf E. coli DNA genomikoaren presentzia aztertzen da TaqManqPCR erabiliz, E. coli 16S rRNA locus-erako abiarazle espezifikoak dituztenekin.E. coli DNA genomikoaren kutsadura ≤1 E. coli genoma da.

    Endotoxina bakterianoa:LAL-proba, TxinakoPharmacopoeiaIV2020edizioaren arabera,gelaren muga proba metodoa, arau orokorra (1143).Bakterioen endotoxina edukiak ≤10 EU/mg izan behar du.

     

    Erreakzio-sistema eta baldintzak

    Osagaia

    Bolumena

    BsaI (20 U/μL)

    1μL

    DNA

    1μg

    10 x BsaI Buffer

    5μL

    dd H2O

    Gehienez 50 μL

    Inkubatu 37 °C-tan 15-30 minutuz.Bero inaktibazioa: 80 °C 20 min.

    Gomendatutako erreakzio-sistemak eta baldintzek entzimaren digestio-efektu nahiko ona eman dezakete, erreferentziarako soilik, mesedez, kontsultatu esperimentazio-emaitzak xehetasunetarako.

     

    Aplikazioak

    Murrizketa Entzimak Digestioa Klonazio azkarra.

     

    Erabilerari buruzko oharrak

    1.Entzimaren bolumena erreakzio bolumenaren ≤ 1 / 10.

    2. Izar-aktibitatea gerta daitekeen glizerolaren kontzentrazioa % 5 baino gehiago da.

    3. Zatiketa-aktibitatea gerta daiteke Substratua gomendatutako proportzioaren azpitik dagoenean.

     

    Idatzi zure mezua hemen eta bidali iezaguzu