2 × PCR Super Mix (koloratzailearekin)
2× PCR Master Mix-ek Taq DNA Polimerasa, dNTPak eta PCR-k behar diren beste osagai batzuk ditu.Master Mix egonkorra da 3 hilabetez 4 ℃-tan gure egonkortzaile pertsonalizatuekin.Aurrenahasketa irtenbidea PCR konbentzionalerako optimizatuta dago eta erabiltzeko prest dago DNA txantiloia eta abiarazleak gehituz.PCR produktuak zuzenean kargatu daitezke elektroforesirako, aurrez kargatutako bromofenol urdineko koloratzailearekin.Anplifikatutako produktuek 3 '-dA irtengune dute eta erraz klonatu daitezke T bektorean.2×PCR Master Mix-ek PCR prozedura errazten du eta kutsadura murrizten du.
Biltegiratzeko baldintzak
Produktuak -25 ℃ ~ -15 ℃-tan gorde behar dira 2 urtez.
Zehaztapenak
Leialtasuna (Taq vs.) | 1× |
Hasiera beroa | No |
Iraunkorra | 3 '-A |
Polimerasa | Taq DNA Polimerasa |
Erreakzio formatua | SuperMix edo Master Mix |
Erreakzio Abiadura | Estandarra |
Produktu Mota | PCR Master Mix (2x) |
Argibideak
1.Erreakzio-sistema
Osagaiak | Bolumena(μL) |
DNA txantiloia | Egokia |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
2 × PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | 50era |
2.Anplifikazio-protokoloa
Ziklo-urratsak | Tenperatura (°C) | Denbora | Zikloak |
Hasierako desnaturalizazioa | 94 | 5 min | 1 |
Desnaturalizazioa | 94 | 30 seg | 35 |
Ontzea | 50-60 | 30 seg | |
Luzapena | 72 | 30-60 seg/kb | |
Azken luzapena | 72 | 10 min | 1 |
Ohar:
1) Txantiloiaren erabilera: 50-200ng DNA genomikoa;0,1-10ng DNA plasmidoa.
2) Mg2+kontzentrazioa: produktu honek 3mM MgCl2 ditu, PCR erreakzio gehienetarako egokia.
3) Erretiro-tenperatura: ikusi lehengaien Tm balio teorikoari.Erretiro-tenperatura lehengaiaren balio teorikoa baino 2-5 ℃ baxuagoa izan daiteke.
4) Luzapen denbora: identifikazio molekularra egiteko, 30 seg/kb gomendatzen da.Gene klonatzeko, 60 seg/kb gomendatzen da.
Oharrak
1.2× PCR Master Mix duten PCR produktuak ez dira egokiak poliakrilamida gel elektroforesirako.
2.Zure segurtasun eta osasunerako, mesedez, erabili laborategiko batak eta botatzeko eskularruak erabili ahal izateko.
3.Ikerketarako BAKARRIK erabiltzen da!