2 × PCR Master Mix (koloratzailerik gabe)
PCR Master Mix PCR aurrez nahastutako soluzio konbentzional mota bat da, erabiltzeko prest dagoena, Taq DNA Polimerasa, dNTP nahasketa MgCl2 eta buffer optimizatua barne.Erreakzioan zehar, abiarazlea eta txantiloia bakarrik gehitu daitezke anplifikaziorako, eta horrek asko errazten ditu esperimentuaren funtzionamendu-urratsak.Produktu honek egonkortzaile bikainak ditu eta 3 hilabetez gorde daiteke 4 ℃-tan.PCR produktuak 3′-dA irtengunea du eta erraz klonatu daiteke T bektorean.
Biltegiratzeko baldintzak
Produktua -25 ℃ ~ -15 ℃-tan gorde behar da bi urtez.
Zehaztapenak
| Leialtasuna (Taq vs.) | 1× |
| Hasiera beroa | No |
| Iraunkorra | 3′-A |
| Polimerasa | Taq DNA Polimerasa |
| Erreakzio formatua | SuperMix edo Master Mix |
| Erreakzio Abiadura | Estandarra |
| Produktu Mota | PCR Master Mix (2×) |
Argibideak
1.Erreakzio-sistema
| Osagaiak | Tamaina (μL) |
| DNA txantiloia | Egokia |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | 50era |
2.Anplifikazio-protokoloa
| Ziklo-urratsak | Tenperatura (°C) | Denbora | Zikloak |
| Desnaturalizazioaren aurrekoa | 94 ℃ | 5min | 1 |
| Desnaturalizazioa | 94 ℃ | 30 seg | 35 |
| Ontzea | 50-60 ℃ | 30 seg | |
| Luzapena | 72 ℃ | 30-60seg/kb | |
| Azken Luzapena | 72 ℃ | 10min | 1 |
Oharrak:
1) Txantiloiaren erabilera: 50-200 ng-ko DNA genomikoa;0,1-10 ng-ko DNA plasmidoa.
2) Mg2+kontzentrazioa: Produktu honek 3 mM MgCl2 ditu PCR erreakzio gehienetarako egokiak.
3) Erretiro-tenperatura: Ikus ezazu Primers-en Tm balio teorikoa.Erretiro-tenperatura lehengaiaren balio teorikoa baino 2-5 ℃ baxuagoa izan daiteke.
4) Luzapen denbora: identifikazio molekularra egiteko, 30 seg/kb gomendatzen da.Gene klonatzeko, 60seg/kb gomendatzen da.
Oharrak
1.Zure segurtasun eta osasunerako, mesedez, erabili laborategiko batak eta botatzeko eskularruak erabili ahal izateko.
2.Ikerketa erabiltzeko soilik!
